磷硫代siRNA的YAP基因沉默活性研究
作者:
作者单位:

四川大学生命科学学院 生物资源与生态环境教育部重点实验室

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通讯作者:

中图分类号:

Q52

基金项目:

国家自然科学基金(21761132029); 中央大学基础研究基金(2016—2020)


Study on YAP gene silencing activity of phosphorothioate siRNAs
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Affiliation:

Key Laboratory Bio-resources and Eco-environment of Ministry Education, College of Life Sciences, Sichuan University

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    摘要:

    为了探究RNA聚合酶酶促合成非对映体纯PS-siRNA(pPS-siRNA)的基因沉默活性,本研究针对潜在的癌症治疗靶点Yes相关蛋白(YAP),通过qPCR、Western blot等方法研究了其对YAP基因的沉默效果和对HeLa细胞的细胞毒性. 结果表明,与未修饰的siRNA(PO-siRNA)相比,pPS-siRNA可以更好地下调YAP基因表达(效率提高约30%),而没有明显的细胞毒性. 此外,MTT细胞增殖实验与流式细胞术的结果表明,经pPS-siRNA敲降YAP后,HeLa细胞的增殖受到了抑制. 说明pPS-siRNA在基因治疗方面具有优越性以及YAP作为肿瘤治疗靶点的潜力.

    Abstract:

    In order to explore the gene silencing activity of diastereomeric pure PS-siRNA (pPS-siRNA) synthesized enzymatically by RNA polymerase, its silencing activity on Yes-associated protein (YAP), a potential cancer treatment target, and cytotoxicity to HeLa cells were studied by qPCR and Western blot in this study. The data showed that compared with unmodified siRNAs (PO-siRNAs), pPS-siRNAs can better reduce YAP gene expression without significant cytotoxicity (approximately 30% more efficient). In addition, MTT cell proliferation assay and flow cytometry showed that the proliferation of HeLa cells was inhibited after YAP down-regulated by the pPS-siRNAs. This research proved the superiority of pPS-siRNAs in gene therapy and the potential of YAP as a tumor therapeutic target.

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引用本文格式: 唐硕,黄震. 磷硫代siRNA的YAP基因沉默活性研究[J]. 四川大学学报: 自然科学版, 2021, 58: 056004.

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  • 收稿日期:2020-11-21
  • 最后修改日期:2021-04-27
  • 录用日期:2021-05-08
  • 在线发布日期: 2021-10-13
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