毛叶山桐子性别相关ISSR分子标记的筛选与分析
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Q945.6

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Screening and analysis of sex-related ISSR molecular marker in Idesia polycarpa Maxim. var. vestita Diels
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    摘要:

    为筛选与毛叶山桐子性别相关的分子标记,本研究优化了毛叶山桐子ISSR-PCR反应体系,并利用优化后的体系逐一筛选100条ISSR引物,然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行多态性检测.实验确立出最佳的25 μL反应体系为:55 ng DNA模板,1 U Taq酶,2 μL dNTPs(2.5 mmol/L),2 μL引物(10 μmol/L),2.5 μL 10 ×Taq Buffer(含Mg2+),超纯水补足总25 μL.利用该体系逐一筛选ISSR引物,在多次重复后只有UBC841引物扩增出的差异性条带可以稳定存在.PAGE电泳结果显示,UBC841扩增产生一条差异性条带,大小在250-300bp之间,存在于毛叶山桐子雌株中,但后期的测序发现该条带是由大小相近的条带组成的混合条带.虽然如此,引物UBC841仍可以作为毛叶山桐子性别相关的分子标记.

    Abstract:

    In order to screen the sex-related ISSR molecular marker in Idesia polycarpa Maxim. var. vestita Diels,the inter-simple sequence repeat-polymerase chain reaction (ISSR-PCR) system was established and optimized.And we found the best ISSR-PCR reaction system with total volume of 25μL was 55 ng DNA template, 1U Taq polymerase,2μL dNTPs tendency(2.5 mmol/L),2μL primers (10μmol/L),2.5μL 10 x Taq Buffer (including magnesium ion)and then adding ultrapure water to make up total 25μL.With this system we discovered only one ISSR primer——UBC841,which could amplify one stable female-special fragment,with size of 250-300bp.By sequencing the female-special fragment,we found the fragment was made up of many fragments with similar sizes,which indicated the female-special fragment showed by PAGE  electrophoresis was a mixed bands.Even so,the primer UBC841 still can be used for sex-related markers to identify the gender of Idesia polycarpa Maxim. var. vestita Diels.

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引用本文格式: 董娜,唐晓姗,唐琳. 毛叶山桐子性别相关ISSR分子标记的筛选与分析[J]. 四川大学学报: 自然科学版, 2016, 53: 465.

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  • 收稿日期:2015-05-12
  • 最后修改日期:2015-07-13
  • 录用日期:2015-10-13
  • 在线发布日期: 2016-05-30
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